关于“脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观察测定法”的一些问题

显示全部楼层 · 2010-12-11 05:48:51

“脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观察测定法”里，先用氚标记的TdR培养细胞一段时间，使细胞均处于S期并被标记，然后洗脱氚标记的TdR，改为新鲜培养液培养一段时间，被标记的细胞陆续进入M期。
提问：1、TdR在这里是作为DNA复制的原料吧？
2、用氚标记的TdR培养细胞后，为什么不能通过S期？如果停在S期的原因是有TdR而导致不能通过S期检验点，那么洗脱是指洗去细胞外的标记培养液，还是指洗去细胞内的TdR？
3、如果是前者，置换新鲜培养液后细胞内应仍有TdR，为什么可进入M期？如果是后者，为什么可观察到被标记的细胞，不是洗脱了么？

千问 · 2010-12-11 05:48:51

1.对的2.看你要观测具体哪个阶段了，不是因为有TdR所以过不了S期的check point，仅仅是实验希望可以观测S期之后M期的情况，洗脱仅仅是洗掉那些多余的，没有被用于DNA复制的总的来说氚标记的胸腺苷依然是胸腺苷，一样可以正常用于DNA复制，不会引起什么问题可以看到被标记的是因为洗脱洗掉的是没有被用于DNA复制的，那些个细胞里面仍然含有标记的TdR