利用EST和生物信息学及细胞分子生物学技术研究某基因的功能，试设计技术路线

显示全部楼层 · 2011-1-5 17:17:08

首先，EST序列的测序，得到该基因的EST片段其次，生物信息学，用Go或者KEGG，分析该基因的功能分类，所在代谢途径等；通过NCBI Blastn，BlastX，tBlastn等比对与该基因同源性较高的基因序列和可能功能；通过ExPASY研究蛋白的特点，二级结构，三级结构等。之后，根据已得到的信息，依据可能的功能设计细胞分子生物学实验，例如，1利用已知序列，通过RACE方法获得该基因的cDNA全序列，通过巢式PCR或者Tail PCR的方法获得全基因组序列及promotor序列2构建过表达载体，在生物体内过表达该基因，看是否获得可见表性
3构建反义RNA载体，或者RNAi载体，使该基因的表达沉默，看是否获得可见表性

千问 · 2011-1-5 17:17:08

先利用EST在网上找出你要研究的那个物种的DNA片段，看看在别的物种中它具有啥功能，根据保守性在你所研究的物种中应该也差不多。把你的基因正义和反义片段分别导入你所研究的物种中，看看对它用啥影响就行啦。你要是没有这个基因的全长那就麻烦了。