考研题 微生物 请高人帮忙 先谢了 有一段已知序列的小分子抗菌肽,论述如何采用生物工程的技术进行表达?

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查看11 | 回复2 | 2011-1-10 19:41:48 | 显示全部楼层 |阅读模式
这是一道论述题,我自己按照我的理解给你回答一下吧,希望能够给你一些帮助首先要知道抗菌肽的表达系统是真核的还是原核的,答题的思路是:1、利用genbank搜索已知序列,如果没有则需要自行测序2、分别测出N端和C端个15个氨基酸序列,利用密码子简并性和偏爱性设计引物3、引物设计出来以后抽提总RNA,用RT-PCR对抗菌肽对应的基因进行扩增。4、测序,将目的基因连接到T载体上,转化入克隆菌(如TG1),蓝白斑筛选,用PCR和酶切鉴定重组结果,获得重组质粒后,以此为模板进行测序,验证目的基因的准确性。5、选择适合的表达系统和适合的载体。可采用大肠杆菌原核表达系统,将目的基因从与T载体的重组质粒上进行双酶切后连接到适合的载体(如pET28
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千问 | 2011-1-10 19:41:48 | 显示全部楼层
过来晃悠一下,顶楼上,答案很强大,纯手打很有责任心,赞一个。
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