请问流式细胞仪检测细胞凋亡的原理是什么？

显示全部楼层 · 2011-1-22 09:25:26

请问流式细胞仪检测细胞凋亡是检测什么指标？如何判定细胞凋亡呢？谢谢！

千问 · 2011-1-22 09:25:26

一、原理在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V进行荧光素（EGFP、FITC）标记，以标记了的Annexin V作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但对凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI能够透

千问 · 2011-1-22 09:25:26

最常用的是annexinv /pi双染检测凋亡，凋亡的细胞膜上的PS（磷脂酰丝氨酸蛋白）会从膜内转移到膜外，我们利用annexinv抗体即可与之结合，有结和得说明这个细胞有凋亡，pi是用来区分死活细胞的，一般认为annexinv阳性，pi阴性的那群细胞即为早期凋亡细胞。