在基因表达构建载体中什么切割质粒什么切割目的基因,为什么?

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查看11 | 回复5 | 2010-7-20 01:40:46 | 显示全部楼层 |阅读模式
质粒是一个闭合的DNA圆圈,你得先切开它,把它切成一条线;然后你再从一长串DNA上切下你要的目的片段,用连接酶像胶水一样,吧质粒的两端和目的片段的两端连接起来——又成一个圆圈了,但是这次这个DNA圆圈已经含有你要的片段了。由于载体质粒只有圆圈状才有活性,才有用,所以你必须这么做。。。
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千问 | 2010-7-20 01:40:46 | 显示全部楼层
切割质粒的时候,一般强调的是用同种限制性内切酶,目的是为了产生相同的粘性末端。但有的时候为了防止目的基因和目的基因相连接,载体和载体相连接,有的时候,我们用两种限制性内切酶来切割,可以防止这种情况的出现,而获得目的基因和载体连接物。
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千问 | 2010-7-20 01:40:46 | 显示全部楼层
识别序列有区别--g↓gatcc--限制酶1,2都可以切,但是--↓gatc--只能有酶2切。懂了么,就是说酶一要识别出6个碱基这样的排序才能切,但是酶二只需要识别出4个这样的排序,酶二的选择性比较低。然后,请给我题目里的那张图~是否在标记基因中存在gatc的序列呢,如果有,酶二会去把他切断,所以就会破坏标记基因了。求采纳为满意回答。
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千问 | 2010-7-20 01:40:46 | 显示全部楼层
同种限制性内切酶为了让他们产生相同的末端方便重组
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千问 | 2010-7-20 01:40:46 | 显示全部楼层
同种限制性核酸内切酶
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