知道蛋白质的分子量和等电点,如何纯化处理（分子质量为80kd，pl=6.3）

显示全部楼层 · 2010-7-6 19:13:34

不胜感激！我应该用那种纯化蛋白质的方法呢？

千问 · 2010-7-6 19:13:34

单单知道这两点还是不太够的。通常的分子筛或者超滤的分辨率都不是很高，特别是在80 kDa左右。反而有一些小肽使用超滤会有好的结果。知道等电点的话，对于离子交换层析会有一定帮助，但是也不是绝对的。楼主看来没有这方面的积累。不过现在的纯化方法最为常用的都是亲和层析，只要将蛋白在表达体系中加上Tag之类的，就很方便了。如果是从组织中提取的话，需要样品的量会比较多，同时还需要建立一定的测活系统（如果有的话），没有测活方法而样品又很少，只能祝福你了！希望运气足够好，能找到方便的条件。

千问 · 2010-7-6 19:13:34

已知分子量可以做分子筛层析或超滤，利用等电点可以做等电点电泳或等电点沉淀。如果你的蛋白不怕有机溶剂，可以先调等电点，作有机溶剂沉淀，再做分子筛。