2010年江苏高考生物第27题填空（4）

显示全部楼层 · 2010-7-19 07:45:24

下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
（1）一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后，分别含有 ▲ 个游离的磷酸基团。
（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越 ▲ 。
（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Srna Ⅰ切割，原因是 ▲ 。
（4）与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 ▲ 。
（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 ▲ 酶。
（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 ▲ 。
（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 ▲ 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。
这个题目的图片点击后可以放大的~！！！！
我不懂什么叫质粒和目的基因的外源DAN片段自身环化

千问 · 2010-7-19 07:45:24

1. 切前0, 切后2 (双螺旋结构,切口两边各有一个游离磷酸基团2. 越高（因为Sma I 识别G-C G-C序列, 而GC之间有三个氢键，比两个氢键的AT热稳定性高，所以Sma I切点越多则质粒中GC碱基对越多，整体热稳定性就越高。3. 因为SmaI 切割后没有黏附端（像前三种酶那样切后有一小段未配对的碱基）所以无法与外源DNA接合，而且SmaI 切点在外源DNA目的基因中，将破坏目的基因。4.防止外源DNA和质粒在切割后自身成环5.DNA连接酶6.对成功接合目标基因的质粒进行筛选（其实认为这道题这里有点小问题，因为一般接合前后不一致才能进行筛选，也就是说，如果质粒含有抗性基因，有效切点应位于抗性基因内部，像

千问 · 2010-7-19 07:45:24

（1）【切割前0】【切割后2】（2）【高】（3）【SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因】【外源DNA中的目的基因】（4）【质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化】（5）【DNA连接】（6）【鉴别和筛选含有目的基因的细胞】（7）【蔗糖为唯一含碳营养物质】【解析】（1）质粒切割前是双链环状DNA分子，

2010年江苏高考生物第27题 填空（4）

2010年江苏高考生物第27题填空（4）