求:流式细胞术荧光指数的计算问题，麻烦大家了，一定会增加悬赏分！

显示全部楼层 · 2011-2-21 17:28:01

看了细胞技术讨论版中很多关于流式细胞术的知识，但是还没有找到我想要的答案，希望各位大侠能够给予指导。
我是用流式细胞术检测cox-2在研究组（腺肌病、腺肌瘤）和对照组中的表达，测得是平均荧光强度。是不是应该换算成荧光指数来计算呢？？关于荧光指数FI的计算问题，看到很多文献中计算荧光指数的公式为
荧光指数FI=(样品蛋白表达的平均荧光强度-对照样品平均荧光强度)/(正常人该蛋白表达的平均荧光强度)
然后再根据FI1为阳性表达。
不明白之处为：一般每个样品给出来的荧光指数已经是该样品的平均荧光指数，若样品为40例，对照样品为26例，这个公式中分子怎么计算啊。分母说是正常人该蛋白表达的平均荧光强度，因为每个正常的对照样品检测的结果也都会有个平均荧光指数，不知这里分母中所指的计算时是按照一个正常对照样品计算的还是按照所以的对照样品的荧光强度再进行平均后带入分母中进行计算？能否举例详细说明。

千问 · 2011-2-21 17:28:01

其实我觉得用平均荧光强度就好了，国外文献上用这个的也很多。因为“正常人该蛋白表达的平均荧光强度”是个很理想化的数值，做过流式就知道，机器、抗体、以及机器的设置对平均荧光强度都有影响，这是流式标准化的一个问题。看你的实验，样品和对照样品都有，它们之间来做显著性比较也是可信的。但你有收集“正常人该蛋白表达的平均荧光强度”吗？如果你自己做了该数值，那么“样品蛋白表达的平均荧光强度”其实是平均荧光强度的平均值。其它数值也是这样处理