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我做连接，用SwaⅠ酶切，平头末端，用T4连接酶25度反应一小时，总是不成功，能给分析一下原因或有好的方法

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1 | 2011-10-15 12:55:52 | 显示全部楼层 |阅读模式

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千问 | 2011-10-15 12:55:52 | 显示全部楼层

平头连接本来就没有粘性末端连接容易，一般我们永T4连接的话是16度过夜，成功率很高。也可4度冰箱放久点。说明书说25度也是可以的，我们一直没有试过。如果前面的实验都正确的，建议采用16度水浴过夜

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千问

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