PCR-DGGE实验原理和优点是什么？

显示全部楼层 · 2011-4-6 11:27:07

PCR-DGGE实验原理和优点是什么？

千问 · 2011-4-6 11:27:07

博凌科为-为你解答：变性梯度凝胶电泳（DGGE）是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分离的凝胶系统。核酸的双螺旋结构在一定条件下可以解链，称之为变性。核酸50%发生变性时的温度称为熔解温度（Tm）。Tm值主要取决于DNA分子中GC含量的多少。DGGE将凝胶设置在双重变性条件下：温度 50~60℃，变性剂0~100%。当一双链DNA片段通过一变性剂浓度呈梯度增加的凝胶时，此片段迁移至某一点变性剂浓度恰好相当于此段DNA的低熔点区的Tm值，此区便开始熔解，而高熔点区仍为双链。这种局部解链的DNA分子迁移率发生改变，达到分离的效果。Tm的改变依赖于DNA序列，即使一个碱基的替代就可引起Tm值的升高和降低。因此，DGGE可以检测DNA分子中的任何一

千问 · 2011-4-6 11:27:07

在碱基序列存在差异的DNA双链解链时需要不同的变性剂浓度，他们一旦解链，在聚丙烯酰胺凝胶中电泳的行为就会发生改变，所以序列不同的DNA片段就会在电泳中的位置不同，不同泳道中同一位置就是序列相同的DNA片段。