1 用PCR仪扩增细胞的DNA，所用的试剂和样品是什么？其循环条件是什么？

显示全部楼层 · 2011-4-13 07:53:31

样品可以用细胞也可以用细胞里提取的DNA试剂DNA聚合酶（依赖于你的目的选择普通Taq酶还是高保真Taq酶）
DNA聚合酶附带的缓冲液，MgCl2（可能有可能没有，没有的一般是公司添加到额缓冲液里了）
dNTP：四种脱氧核糖核苷酸
无菌水循环条件: 95℃
3~10min
95℃
30sec
55℃（取决于你的引物的退火温度，可以用梯度PCR摸索）
30sec
total 25~35 cycle
72℃
60sec（时间取决于你的酶的扩增效率与

千问 · 2011-4-13 07:53:31

试剂与样品：模板DNA,buffer（包含有Mg+），dNTP,引物，DNA聚合酶。循环条件，根据你的目的产物的片段大小，及引物的退火温度，都不一样的我之前用过的一个程序是这样的95℃
5min95℃
30sec57℃
30sec
total 35 cycle72℃
60sec72℃

千问 · 2011-4-13 07:53:31

模板DNA，四种dNTP原料(ATP.CTP.TTP.GTP)，引物，Taq酶。一般来说，在酶未饱和、原料充足的情况下，PCR可循环。