RT-PCR中内参蛋白GAPDH和b-actin在人和动物细胞中扩增可以用同一对引物吗?

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查看11 | 回复3 | 2010-11-9 09:49:48 | 显示全部楼层 |阅读模式
正在做RT-PCR实验,所用细胞系有人肿瘤细胞和小鼠巨噬细胞,请问所用内参蛋白GAPDH和b-actin在这两种细胞系中可以用同一对引物吗?

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千问 | 2010-11-9 09:49:48 | 显示全部楼层
要回答这个问题必须看你引物的序列。你贴出来我帮你查一下,你自己也可以BLAST一下。如果在人和鼠的基因中都可以BLAST到,则可以用,否则就不可以。虽然这些House Keeper基因的同源性很高,如果引物不在同源区,还是没办法混用的。
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千问 | 2010-11-9 09:49:48 | 显示全部楼层
通常来说是不可以的.可以去查查看你够入引物那见公司所制做的引物可不可以同用在人和小鼠上.
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千问 | 2010-11-9 09:49:48 | 显示全部楼层
你可以blast一下,如果同源的化有可能出条带,但产物的大小应该不一样,最好不用同一个,不然文章也没说服力。
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