PCR产物胶回收后的鉴定

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查看11 | 回复2 | 2008-7-20 19:52:35 | 显示全部楼层 |阅读模式
PCR产物胶回收后的CDNA鉴定除了拿去侧寻,是直接用来跑电泳还是再进行PCR后跑电泳?

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千问 | 2008-7-20 19:52:35 | 显示全部楼层
看你胶回收前的东西多不多,多的话,而且溶的水也和原来差不多,跑电泳就可以看了,胶回收的效率还是可以的,一般都能看见,如果因为少担心看不见,可以用核酸测量计测量,那种小的只需要两微升左右就可以测出你的样品浓度.
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千问 | 2008-7-20 19:52:35 | 显示全部楼层
我的做法是,回收的CDNA不管质量好坏,都用High Fidelity PCR Enzyme Mix高保真酶和特异引物扩增一下下。然后再回收一次。随后测序。当然主要原因是检验一下回收CDNA是否是我的目的条带。第二就是浓度达到要求
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