如何从细胞样品中募集DNA？

显示全部楼层 · 2011-6-23 21:38:48

核酸的基本分离程序首先是物理或化学法破碎细胞获得裂解液；然后去除与核酸结合的蛋白质、多糖、脂类等杂质；最后纯化核酸，去除盐类，有机溶剂等杂质。DNA分离的基本方法与原理（1）浓盐法：利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同，将二者分离，常用的方法是用 1M NaCl 抽提，得到的DNP粘液，然后与氯仿:异戊醇（24:1）一起摇荡使乳化，离心除去蛋白质，此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间，而DNA位于上层水相中，用2倍体积 95%乙醇可将 DNA 钠盐沉淀出来。（2）阴离子去污剂法：用 SDS 或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性，可以直接从生物材料中提取DNA。由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合，阴离子去污...

千问 · 2011-6-23 21:38:48

可采用EDTA以及SDS等试剂存在下用蛋白酶K消化细胞，然后用酚抽提实现。...