用荧光定量pcr的方法进行相对定量其结果的稳定性，可信度如何？

显示全部楼层 · 2008-11-11 21:49:25

染料用SYBR Green 1，为什么定量的结果和用报告质粒检测gus的结果不太一致

千问 · 2008-11-11 21:49:25

定量pcr最好每个样本有三个重复，每次试验做三遍比较可靠。因为比较灵敏，有微小差异会影响很大。并且记得检查每个孔是否有误差很大的数值，如果有误差很大的孔建议删掉这个结果，可能是膜没有密封好...

千问 · 2008-11-11 21:49:25

RT-PCR每个样品做3个平行样最好（其实2个也可），平行样之间循环数相差在0.2之内较为可靠。结果中有一个图是看特异性的，如果峰值基本都在同一位置，则再看不同样品间循环数的结果较为准确。同时还要设立内参，以确定样品结果的可信性。其实我也是刚刚接触，说的不知道清楚不清楚，也不知道对你有没有帮助。...