求助,EGFP的酶切连接方案

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查看11 | 回复1 | 2009-7-24 09:41:04 | 显示全部楼层 |阅读模式
想从pEGFP-N2上的EGFP切下来替换质粒pLM21上的GFP。
EGFP与GFP两端没有相同的酶切位点,请高人相助,如何设计方案。

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千问 | 2009-7-24 09:41:04 | 显示全部楼层
先从pLM21上用相应的酶切下来GFP,然后不要从pEGFP-N2上切下eGFP,而是用PCR扩增出来,扩增的时候使用的引物要设计上pLM21的GFP两端的相应的酶切位点,然后分别纯化基因片段,连接、转化、挑选正确重组子即可。...
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