同样的孔，细胞蛋白表达量不同，是什么缘故？

显示全部楼层 · 2009-7-28 21:12:34

各位高手们请教一下，我加了同样的药量给6孔板上两个一样的孔，结果电泳压片时发现两个目的蛋白表达量竟然不一样，这是怎么回事？我可以确定没有操作问题。

千问 · 2009-7-28 21:12:34

虽然你说过没有操作问题，但是不清楚你说的“操作问题”是哪些？所以可以考虑以下：1.你的药是脂溶性的还是水溶性的？如果药物在培养液的溶度很低则有可能沉淀造成结果不一。2. 加药以前是否看过两孔上的细胞生长情况？两孔的细胞数量是否相同？3. 你的药是否有毒性？如果有，是否造成大量细胞死亡?4. 细胞是否紧密贴壁？在洗的过程中是否流失细胞？5. 在电泳之前是否测量蛋白浓度以胶上每孔含量相当？6. 表达量差多少？ 10－20％的误差属于正常。...