细胞融合问题

显示全部楼层 · 2009-2-11 20:28:09

请问两种细胞融合后,在筛选融合细胞是怎么保证得到基因组完整的细胞,而不是因为杂合子丢是由基因缺失的细胞?谢谢!

千问 · 2009-2-11 20:28:09

选择性筛选的参照标准是自己定的，可以由融合前细胞的特性出发，找出其中之一的代谢特点。比如在筛选杂交瘤细胞时，B细胞是可以进行细胞外途径的DNA合成的，但是寿命很短。而骨髓瘤细胞是没有细胞外源合成DNA这一途径的。所以我们提供的培养基可以是阻断细胞内源合成DNA途径的选择培养基，这样，单一的瘤细胞会合成不了DNA而死亡，单一的B细胞在一段时间后，也死亡。剩下的只有需要的杂交瘤细胞了。这是经典的HAT选择培养基的原理。缺失基因的细胞，是不能正常代谢的，一般是会死亡的，但在某些特殊实验中，人工培养一些缺陷型细胞，以便于标记特征，便于筛选也是可以的。找出的代谢特点还可以包括，温度差异，PH差异等，很灵活，也很困难。...