如何鉴定一个蛋白是否为膜蛋白

显示全部楼层 · 2009-3-13 22:24:42

1，跨膜结构一般是什么样的氨基酸序列？非极性的一系列氨基酸？@螺旋？
2，脂膜结合实验是用什么材料做？我纯化的蛋白只有在有表面活性剂和甘油的缓冲液中能稳定存在。
4，如何观察蛋白是否结合于脂质微体上？

千问 · 2009-3-13 22:24:42

判断一个蛋白是否是膜蛋白的直接证据只有通过插入分析（import assay）获得，一般的做法是对于你的目的蛋白cDNA做体外转录翻译后于插入缓冲液中与含相应膜结构的细胞或者细胞器（线粒体、叶绿体等）孵育然后分别设置无处理、蛋白酶K处理、非离子型去垢剂处理及低渗处理，放射自显影分析蛋白质插入状况。...

千问 · 2009-3-13 22:24:42

1、可考察其氨基酸序列，看是否具有跨膜结构域。 2、可作脂膜结合实验。但需要纯化相关蛋白。 3、用荧光蛋白标记看是否是膜定位。 4、细胞匀浆为脂质微体，观察该蛋白是否结合于脂质微体上。1、一般是以α螺旋穿膜。氨基酸一般是疏水性氨基酸。有网站可以预测。2、这种一般用于具有通道性质的膜结合蛋白。和脂质层结合后两侧可进行离子或分子通透。...