蛋白浓度的测定方法的确定及验证问题（不受精氨酸影响）

显示全部楼层 · 2009-8-17 09:36:51

理论上说，bradford法受到碱性氨基酸（特别是精氨酸）和芳香族氨基酸干扰，不适合。Lowry和双缩尿是测定肽键的，不受精氨酸干扰。至于HPLC 分子筛，那是分离方法，用于测定浓度还要看所用的检测器。一般用紫外检测，会受芳香族氨基酸干扰，不怕精氨酸。如果有标准品的话，还是紫外最好，简单快速，又不受精氨酸影响。...

千问 · 2009-8-17 09:36:51

个人认为HPLC法更不受精氨酸或其他氨基酸含量的影响。因为Lowry、bradford和双缩脲都是靠蛋白质里特殊氨基酸的颜色反应来测定蛋白含量。而HPLC兼顾了HPLC的良好分离特性，以及紫外检测的灵敏性。你可以用将你的目标蛋白用酸水解法水解为氨基酸后单测精氨酸含量，然后和你的各种检测方法比较。...