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T载体连接步骤是怎么样的？都要注意些什么呢？

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1 | 2012-4-9 12:21:20 | 显示全部楼层 |阅读模式

PCR产物纯化后测定DNA的浓度，按照适当的比例与T-Vector在含有连接酶的buffer中4°过夜或37°3小时连接，然后连接产物涂筛选平板（ALB)筛选即可。要确保产物末端有A尾，如果是高保真酶扩增的产物需先加A尾，纯化后再连接；再就是载体和产物的比例要合适。...

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