研究小组从小鼠血管内皮细胞分离到一个新基因，请设计一个研究方案对该基因进行定性、定量以及定位分析。

显示全部楼层 · 2011-12-2 01:14:57

1）首先确认这是一个真正的基因，然后克隆到带标签的真核表达载体，转染细胞，检测蛋白的表达。同时注意观察对细胞增殖啦形态啦有没有什么影响，这个可能性不是很大，但注意细节。2）同时用这个序列在NCBI做blast，找其同源序列，有没有序列类似，可能是同一蛋白家族成员的。寻找其在其他物种中有没同源序列，功能是否已知。这些可以作为功能研究提示。3）设计其RNAi片段，做基因敲除，看敲除后老鼠有没有表型，如果有，是非常非常重要的功能提示。4）如果实在没有得到什么线索，可以选择做酵母双杂交，筛选其相互作用蛋白，看它是不是通过跟功能已知的蛋白互作来调控细胞功能的，这是研究新基因的非常重要的方法。
总之，找到一个新基因就像认识一个新人，先确认他是个人，然...