下图A为4种限制酶的识别序列和酶切位点,图B为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点。

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查看11 | 回复2 | 2013-4-27 21:28:07 | 显示全部楼层 |阅读模式
您好!请注意:图中灰色部分为荧光素酶基因编码区,而BamH I的酶切位点位于编码区内,如果使用BamH 1会切断荧光素酶的编码区,无法获得完整的目标基因(荧光素酶基因);Sma I产生的切口没有粘性末端(亦称墩性末端),无法用于重组。您确定答案只有 Msp I吗?一般在获取一个目的基因时,至少要有一种以上的酶去切,才能获得一个目的基因,所以最应选择的酶是 Msp I和MboI(充分必要条件),因为光有 Msp I只能把前面那段无用的DNA切掉,而MboI后面的部分还在,也必须用MboI切掉,才算获得目的基因。还不懂可追问!...
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千问 | 2013-4-27 21:28:07 | 显示全部楼层
想把荧光素酶基因切出来,至少需要两个酶切位点,一个切上游,一个切下游。以本题为例,BamHI在基因中间不能用,想切出荧光素酶基因要么需要MspI+MboI,要么需要MspI+SmaI。只用MspI怎么能把荧光素酶基因切出来呢?...
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