为什么筛选受体细胞时根据抗性基因而不是目的基因

显示全部楼层 · 2013-5-21 11:33:31

这里最重要的是要区别基因工程中出现的最后未成功的两种情况。一种是：目的基因导入了受体细胞但却没表达。（目的基因不是只要导入受体细胞就能表达的，它本身的表达要受到一些修饰部位影响）。第二种是：目的基因根本没有导入受体细胞。抗性基因一般是位于运载体上，它属于标记基因。选择运载体时它必需要有合适的标记基因，就是因为标记基因的目的就是通过它判断重组DNA（目的基因和运载体结合的物质）是否导入了受体细胞。（如第4步中，如果表现有抗性，说明重组DNA已经进入了受体细胞，否则受体细胞不会表现出抗性。）如果导入了受体细胞，最后就要看目的基因是否表达了，此时就是你说的第5步了。看有没有相应的蛋白质或出现相应的性状，甚至用杂交方法看有没有形成相应的mRNA。...

千问 · 2013-5-21 11:33:31

这里的抗性基因就是标记基因，一般存在于质粒上，如抗青霉素基因。在筛选时，可以将受体细胞培养在含有含青霉素的培养基因上，不能生长的就是导入了目的基因的细胞。当然，只有一个这样的基因是不够的，还要有其他的标记基因配合进行筛选。...