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考马斯亮蓝G-250配制时先加水後加磷酸有无影响

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1 | 2012-8-30 11:22:53 | 显示全部楼层 |阅读模式

肯定有影响呀，而且你这个配方有问题，我们操作的是，100mg的考马斯亮蓝G250溶于50mL95%的乙醇，最好边搅拌边加入85%的磷酸100ML，继续搅拌，溶液变为红棕色，因为考马斯亮蓝的磷酸盐溶液是棕红色的。如果你们先加水再加磷酸，生成考马斯亮蓝的磷酸盐的量会因为溶度被稀释而大大减少，降上述操作得到的母液稀释到1升，稀释后的溶液一定要用双层滤纸过滤，滤液呈棕色，且无悬浮物。一定要过滤，因为稀释后会产生蓝色的悬浮物，另外，你们工作液的浓度很重要，吸光度在0.2～0.8之间为宜，因为太高或太低都不符合BEER定律，我们可以做出0.999的标准曲线，祝你们好运...

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