结合还原糖蛋白质的检测实验从成分操作步骤和所需条件角度,分析斐林试剂与双缩脲试剂的不同点

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查看11 | 回复2 | 2012-9-3 16:26:54 | 显示全部楼层 |阅读模式
检测还原糖的斐林试剂和检测蛋白质的双缩脲试剂成分都是硫酸铜和氢氧化钠,但是因为试剂加入的顺序和浓度不同,使得作用原理不同:
斐林试剂中氢氧化钠的浓度是0.1g/ml,硫酸铜的浓度是0.05g/ml,使用时,两种试剂要先混匀,此时会形成氢氧化铜沉淀,它可以和可溶性还原糖(葡萄糖)反应,在水浴加热条件下,能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
双缩脲试剂中氢氧化钠的浓度是0.1g/ml,硫酸铜的浓度是0.01g/ml,使用时,先加氢氧化钠,造成碱性环境,然后加入硫酸铜,因为只有在碱性环境中,蛋白质才能与铜离子反应,形成紫色的络合物。
在条件方面的不同:就是斐林试剂需要水浴加热,而双缩脲试剂不需要。...
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千问 | 2012-9-3 16:26:54 | 显示全部楼层
检测还原糖:斐林试剂是新制氢氧化铜,先把硫酸铜和氢氧化铜配置成新制氢氧化铜,再滴加到还原糖溶液中,热水浴或者加热条件,生成红黄色沉淀。检测蛋白质:蛋白质溶液中先滴加氢氧化铜,提供碱性环境,摇匀,再滴加硫酸铜,摇匀,出现紫色...
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