pcr杂带在目的条带之上。以前有做过同样的程序,同样的引物和酶。

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查看11 | 回复3 | 2012-9-15 13:33:20 | 显示全部楼层 |阅读模式
可能有以下几种情况:一,误差性,即便是用同样的东西,同样的程序,分别两次来做,出现的结果也可能是不一样的,因为每次取的东西,用的PCR仪都会有误差。二,可能是主要的原因,所用的引物质量不是太好。建议:一种是用现在的引物,将PCR的退火温度提高。另一种是换一家好的公司重合引物。...
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千问 | 2012-9-15 13:33:20 | 显示全部楼层
这种情况我遇见很多次,最终发现,其实是引物放时间久了部分降解的缘故。你重新合成引物就好了。...
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千问 | 2012-9-15 13:33:20 | 显示全部楼层
细菌DNA是怎么获得的?是菌落PCR还是抽提的基因组DNA?是新鲜制备还是之前保存的核酸?通常在已经确认的系统中出现这种类型的杂带,除了模板的问题,多半认为是系统中有东西污染了。需要在电泳中检测阴性对照(不加模板的PCR反应体系),确认系统没有污染。也需要重新制备模板,并尝试减少模板用量,看是否能改善情况。...
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