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【求助】哪种方法建立的全长cDNA文库质量最好？

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1 | 2013-10-12 14:04:08 | 显示全部楼层 |阅读模式

做相同工作的战友们一起讨论一下吧。最好给介绍一下彼此的经验。这个盒子本身有一些缺陷，你发现没有在他已经构建好的CDNA文库中没有肺的文库，而我恰好是构建肺的文库，即使在RNA很好的前提下都不是很亮，这个盒子对于一些特殊的基因构建效果很差，第二条链有时候出不来，最新的MEKER公司的以及INVIROGEN的TOPO的方法一、保证获得数量足够的高质量的起始RNA。构建cDNA文库要求的RNA量比做RACE和Northern blot的要多，在材料允许的情况下一般的试剂盒均推荐采用纯化总mRNA后进行反转录，这比直接采用总RNA进行反转录而构建的cDNA文库好，虽然后者也并不是不能做。老版本CLONTECH的SMART 4的中级柱子要求纯化后的总mRN...

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