脾细胞和骨髓瘤细胞融合后，如何筛选杂交瘤细胞？其原理是什么？

显示全部楼层 · 2013-8-30 13:22:56

细胞融合是一个随机的物理过程。在小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞混合细胞悬中，经融合后细胞将以多种形式出现。如融合的脾细胞和瘤细胞、融合的脾细胞和脾细胞、融合的瘤细胞和瘤细胞、未融合的脾细胞、未融合的瘤细胞以及细胞的多聚体形式等。正常的脾细胞在培养基中存活仅5～7天，无需特别筛选，细胞的多聚体形式也容易死去。而未融合的瘤细胞则需进行特别的筛选去除。细胞DNA合成一般有两条途径。主途径是由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，叶酸作为重要的辅酶参与这一合成过程。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经次黄嘌呤磷酸核糖转化酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）的催化作用合成DNA。细胞融合的选择培养基中有三种关键成分：次黄嘌呤（hypoxa...

千问 · 2013-8-30 13:22:56

放在选择性培养基上培养..杂交到的细胞有 3种脾细胞和脾细胞，脾细胞和瘤细胞，瘤细胞和瘤细胞。3种 ..放在选择性培养基上连续培养.比如说有什么脾细胞可以分泌出抗体那种抗原的物质...而其他细胞不能够抵抗..脾细胞和脾细胞一般不会培养到50代..就会死了..放在选择性培养基上的瘤细胞和瘤细胞没有相应的抗体所以自动被消灭掉..脾细胞和瘤细胞.....