为什么在在基因工程中使用限制酶不是将目的基因从染色体上切割下来

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查看11 | 回复3 | 2009-8-21 11:23:27 | 显示全部楼层 |阅读模式
染色体包括DNA和蛋白质,而限制酶只能作用于DNA上的磷酸二酯键,不能作用于蛋白质,所以不能直接将目的基因从染色体上切下.只能将DNA和蛋白质分开后,再去处理DNA.
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千问 | 2009-8-21 11:23:27 | 显示全部楼层
不可能用限制酶从基因组中获得目的基因。首先目的基因在基因组中的拷贝数一般都很少,多数只有一个。一大管基因组中只有一丁点目的基因。其次限制酶的识别序列太短,难以保证除了目的基因以外庞大的基因组中没有其他可以识别的位点。所以都是先通过PCR的方法把目的基因扩增,然后连接到比基因组小得多且酶切位点已知的质粒上,再用限制性酶切割就能保证只切到目的基因。
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千问 | 2009-8-21 11:23:27 | 显示全部楼层
染色体=DNA+蛋白质,有遗传效应的只是染色体中的DNA,所以说限制酶切割DNA更严谨,而且一般用作载体的质粒就是双链环状DNA,算不上染色体。你指的染色体是高度螺旋化的染色质吗?如过这样的话单凭限制酶根本接触不到被蛋白质包裹的DNA是真核细胞的染色体还是原核细胞的染色体?细菌的拟核就是细菌染色体,所以说限制酶的本质就是切割DNA的磷酸二酯键。
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千问 | 2009-8-21 11:23:27 | 显示全部楼层
限制性内切酶作用的是磷酸二酯键你这问的什么啊啥意思啊
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