如何测定牛奶中蛋白质含量,要具本步骤.原理和方法,知道的说下,谢谢

显示全部楼层 · 2012-3-12 13:13:13

实验原理：蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氮与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。实验仪器与试剂（1）定氮蒸馏装置
（2）硫酸铜（3）硫酸钾
（4）浓硫酸（5） 2%硼酸溶液（6）混合指示液：1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。（7） 40%氢氧化钠溶液。（8） 0.05N硫酸标准溶液或0.05N盐酸标准溶液。实验步骤（1）试样制备精密称取 0.2～2.0g 固体样品，移入干燥的 100mL 或 500mL 定氮瓶中，加入 0.2g 硫酸铜，3g 硫酸钾及 20mL 硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上。小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持质瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热 0.5h。取下放冷，小心加 20mL 水。放冷后，移入 100mL 容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。（2）定氮装置的连接于水蒸气发生瓶内装水至约2/3处，加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入数粒玻璃珠以防暴沸，用调压器控制，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。（3）试样测定向接收瓶内加入 10mL2% 硼酸溶液及混合指示液1滴，并冷凝管的下端插入液面下，吸取 10.0mL 样品消化稀释液由小玻杯流入反应室，并以 10mL 水洗涤小烧杯使流入反应室内，塞紧小玻杯的棒状玻塞。将 10mL40% 氢氧化钠溶液倒入小玻杯，提起玻塞使其缓缓流入反应室，立即将玻塞盖紧，并加水于小玻杯以防漏气。夹紧螺旋夹，开始蒸馏。蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内，蒸馏 5min。移动接受瓶，使冷凝管下端离开液面，再蒸馏 1min。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，以 0.05N 硫酸或 0.05N 盐酸标准溶液滴定至灰色或蓝紫色为终点。7 结果计算7.1计算(V1-V2)×N×0.014X= ——————————— ×F×100m×10÷100式中： X—样品中蛋白质的含量，%；V1—样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积，mL；V2—试剂空白消耗硫酸或盐酸标准液的体积，mL；N—硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度；0.014—1N硫酸或盐酸标准溶液 1mL 相当于氮克数；m—样品的质量（体积），g(mL)；F—氮换算为蛋白质的系数。蛋白质中的氮含量一般为15～17.6%，按 16%计算乘以6.25即为蛋白质，花生为5.46。

千问 · 2012-3-12 13:13:13

那得有专门的仪器。比如，测一下刚挤的牛奶里的蛋白含量是多少，用仪器一测就知道了。

千问 · 2012-3-12 13:13:13

楼下说的凯式法测不出是否掺假 ... ... 在线乳品分析仪，是间接法，定标也是按照凯式法而得出的结论