质粒电泳跑慢

显示全部楼层 · 2014-8-11 23:18:00

质粒电泳跑慢

发病时间：不清楚
质粒电泳跑慢

补充说明：质粒电泳跑慢

千问 · 2014-8-11 23:18:00

罗李赞
医师
安阳市平和医院
擅长：全科
提问
我硕士专业是分子生物学这方面的，我可以很负责地告诉你，质粒DNA分子具有三种构型：共价闭合环开DNA（cccDNA,SC构型）、开环DNA（OC构型）和线性分子（L构型）。在细菌体内，质粒DNA是以负超螺旋构型存在的。在琼脂糖凝胶电泳中不同构型的的同一种质粒DNA,尽管分子量相同，但具有不同的电泳迁移率。其中跑在最前沿的是共价闭合DNA，其后依次是线性DNA和开环DNA,其原因是共价闭合的DNA其空间位阻最小，所以跑得最快。而开环DNA空间位阻最大，所以跑得最慢。
这些结论都是经得起实验考验的，我在做质粒的上有没有这个酶切位点鉴定的时候，我就会用原质粒和经过单酶切的质粒在同一块胶上进行电泳，看单酶切后的质粒是不是比原质粒跑得快从而鉴定出质粒有没有被切开。这个也分子生物学领域应用很广泛，PCR-RFLP方法就是基于这个原理进行限制性内切酶图谱方面的鉴定的。
2014-08-11 23:18
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千问 · 2014-8-11 23:18:00

杨影枫
医师
贵阳市安顺医院
擅长：全科
提问
这个可能性很多啊。最大的可能是你的酶污染了其他酶。还有这种问题你要是觉得其他两条带大小正确，就不要太纠结了，往后做吧。如果非得找原因的话，再重复几次，酶用量，酶切时间之类的多考虑点。
2014-08-11 23:18
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