血浆肝素

显示全部楼层 · 2014-8-15 17:24:00

血浆肝素

发病时间：不清楚
血浆肝素

补充说明：血浆肝素

千问 · 2014-8-15 17:24:00

张大炳
医师
平凉市珍爱医院
擅长：全科
提问
此药毒性较低主要不良反应是用药过多可致自发性出血故每次注射前应测定凝血时间.如注射后引起严重出血,可静注硫酸鱼精蛋白进行急救.偶可引起过敏反应及血小板减少常发生在用药初5-9天故开始治疗1个月内应定期监测血小板计数.偶见一次性脱发和腹泻.尚可引起骨质疏松和自发性骨折.肝功能不良者长期使用可引起抗凝血酶耗竭而血栓形成倾向.
2014-08-15 17:24
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千问 · 2014-8-15 17:24:00

司徒横
医师
漳州市盛安医院
擅长：全科
提问
血浆肝素水平的监测，现以凝固试验应用较多，如凝血酶时间、部分凝血活酶时间等〔1～3〕，这些方法均是以一段时间范围衡量肝素的抗凝活性，无法精确定量测定。最近有高效液相色谱法分离测定血中游离肝素含量的报道〔4〕。本文介绍用高效毛细管电泳法(HPCE)测定血浆中肝素含量，能直接定量测定，且与凝血酶法〔3〕测定结果进行对照，含量抗凝效果一致。本文　　方法快速、方便、灵敏度高，能直接进行大剂量检测，且不受纤维蛋白降解产物(FDP)等其它因素的影响。与高效液相色谱法相比具有操作简便、自动进样等优点。　　1 研究对象　　正常人5名，体外循环10例(肝素钠，按360～500U/kg给药)，血液透析23　　例(10例肝素钠、5例小剂量肝素钠、3例大剂量肝素钠分别按65、10.5、120U/kg　　给药；5例肝素钙按50U/kg给药)以上均为一次性给药，给药后30min采血。　　2仪器与试剂　　Bio-Focus 3000 Capillary Electrophoresis System(Bio—RAD公司)；未涂渍　　毛细管(30cm×50μm，河北永年光导纤维厂)；肝素钠水溶液(250000U/L，上海　　生物制药厂产品)，肝素钙水溶液(500000U/L，云南生化制药有限公司产品)。　　以上2种肝素抗凝活性用药典(USP)的标准肝素钠(350000U/L)校正。与厂家　　标示量相符。SDS(Bio—RAD，USA)电泳纯级，乙腈为色谱纯级，硼砂、氢氧化　　钠均为国产分析纯级。　　3实验方法　　3.1血样处理研究对象静脉采血2mL(109m mol/L的枸橼酸钠1∶9抗凝)，离心，　　分离出血浆约1.0mL(3000g×15min)，加入乙腈(血浆与乙腈比例为2∶3)混匀，　　充分混合后放置1min，待蛋白沉淀后再次离心(3000g×15min)，取上清液，仪器　　自动进样。未经乙腈处理的血浆可保存，但不超过一周，不允许反复冻融。　　3.2对照品溶液的配制精确取250000U/L的肝素钠、500000U/L的肝素钙各　　10μL混合作为对照液，用双蒸水稀释成500μL。　　3.3电泳条件25m mol/L SDS、pH8.5、25m mol/L硼砂电泳缓冲液，配制方　　法及毛细管的处理方法按文献〔5〕。毛细管温度20℃，电压20kV，检测波长270nm，　　自动压力进样55.16kPa。计算采用外标法，用样本与标准的峰面积比求得肝素含量。　　4结果　　4.1电泳图肝素钠与肝素钙相对迁移时间均为2.58min，峰型对称，分离良好，　　达到基线分离。正常人未检出肝素，见图1。含肝素钙血浆标本色谱图与肝素钠类似。
2014-08-15 17:24
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