运载体必须能够在宿主细胞中复制并保存的目的是什么

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查看11 | 回复2 | 2009-12-31 10:27:59 | 显示全部楼层 |阅读模式
题干的载体指的应该是质粒之类的能连接目的基因的东西吧。既然能连接目的基因那其本身肯定是DNA了。提供大量的目的基因的原因有两个,一个是增强宿主细胞蛋白的表达或者抑制某种蛋白的表达。基因都是为了去调控蛋白的,举个例子,如果我们想增强某种细胞的增值能力,我们就会导入增强增值能力蛋白表达的基因,例如PCNA,slex等等;相反如果是肿瘤细胞的话,我们就想导入抑制其增长的基因。目的基因是为了和载体(质粒)连接,而不是为了剪切的。有很多生物体的繁殖没有你想想的那么简单,因为不同的细胞其扩增的时间是千差万别,假设你需要的基因位于这种细胞内,你只能将你的目的基因连在质粒,放到其他增值快的细胞内获取你的目的基因。看了你倒数第3行的话感觉你不知道BCD为什么错了,因为筛选出符合的质粒,那是需要质粒上连接有抗生素抗性基因,在含有那种抗生素的培养基中,只有连接有你目的基因的细胞才能生存,所以能筛选出来,这是C里面讲的,而C的后半段的原因是D能够在宿主细胞中复制并保存,B有多个限制酶切点,是为了连接目的基因片段。我不是老师说错了别在意哦,有兴趣的话你可以去图书馆看看分子生物学方面的书。
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千问 | 2009-12-31 10:27:59 | 显示全部楼层
常用的载体(也就是运载体)基本作用有2个,也就是说分为2种,一种是穿梭载体,一种是表达载体。穿梭载体(shuttle vector)是指含有两个亲缘关系不同的复制子,能在两种不同的生物中复制的。例如既能在原核生物中复制,又能在真核生物中复制的载体.这类载体不仅具有细菌质粒的复制原点及选择标记基因,还有真核生物的自主复制序列(ARS)以及选择标记性状,具有多克隆位点.通常穿梭载体在细菌中用于克隆,扩增克隆的基因,在酵母菌中用于基因表达分析.表达载体(Expression vectors)就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等),是目的基因能够表达的载体。如表达载体pKK223-3是一个具有典型表达结构的大肠杆菌表达载体。其基本骨架为来自pBR322和pUC的质粒复制起点和氨苄青霉素抗性基因。在表达元件中,有一个杂合tac强启动子和终止子,在启动子下游有RBS位点(如果利用这个位点,要求与ATG之间间隔5-13bp),其后的多克隆位点可装载要表达的目标基因。穿梭载体多用于实验室进行实验的前期研究,表达载体多用于需要大量的基因片段的后续实验研究。太具体的记不清了,有兴趣可以查查相关的分子实验方面的资料
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千问 | 2009-12-31 10:27:59 | 显示全部楼层
做为运载体必须具备:1、能在宿主细胞中稳定保存并能随宿主细胞的DNA复制而复制。2、具有多个限制酶切点,以便运载更多种目的基因。3、具有某些标记基因,以便于确定导入目的基因是否成功。4、不能影响宿主细胞的生命活动。所以BCD对应的理由错误,而A复制后可以得到大量目的基因也没什么错。至于“筛选出符合的质粒”也不能这样说吧。
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