植物抗旱性与拟南芥转基因之间的关系及具体步骤

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查看11 | 回复1 | 2012-11-6 00:25:56 | 显示全部楼层 |阅读模式
拟南芥是十字花科拟南芥属的,作为一种模式植物,生长周期短、室内生长条件要求简单、背景表达不复杂。你说的这个问题其实不麻烦,你只需要找出一个抗旱基因(如ncbi其他物种已发表的,在这个同源性较高的基因保守域上设计引物扩增,5‘race+3’race,连T载体测序,比对拼接,返回到cDNA扩增出全长cDNA,这样你就得到一个新基因)下一步就是构建真核表达载体,通过在引物两端设计酶切位点构建正义、反义表达载体,转化大肠杆菌,进一步转化农杆菌,到此你的表达载体就初步构建完成。之后的工作就是拟南芥的遗传转化,农杆菌介导,方法有好多,浸花、滴染什么的都行,拟南芥收种子之后筛选阳性苗,到T3代就能做表达模式分析什么的了,表型观察抗旱性,实时定量比较阳性(正反义)和野...
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