已知一个物种的基因组,怎么克隆目的基因

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查看11 | 回复1 | 2013-5-21 20:49:17 | 显示全部楼层 |阅读模式
这个呢一般的做法就是首先构建基因文库或者cDNA文库, 基因文库和cDNA文库建立起来后,下一步的工作是从一个庞大的基因库中分离出所需要的重组体克隆,这是一件难度很大,费时费力的工作。一种方法是根据重组体某种特征从库中直接挑选出重组体,这种方法叫做“选择”;另一种方法是把库中所有的重组体进行一遍筛查,这种方法叫做“筛选”。 1.原位杂交法:这一种利用特异探针的直接选择法,是一种十分灵敏而且快速的方法,用于杂交的探针可以是双链DNA,也可以是单链DNA,或是RNA。杂交的检测常用放射性同位素标记探针,通过自显影来进行。显然,有效进行杂交筛选的关键是获得特异的探针。探针的获得有如下方法:①如果目的基因序列是已知的,或部分序列是已知的,探针可...
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