DNA探针如何检测疾病

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0 | 2009-1-30 06:28:38 | 显示全部楼层 |阅读模式

探针利用杂交技术检测特异核酸序列必须使用探针。一个探针可以是能检测互补核酸序列的简单的DNA或RNA分子。探针必须是纯净的，而且不受其他不同序列核酸的影响。典型的探针是克隆的DNA序列或通过PCR扩增获得的DNA。人工合成的寡核苷酸或从体外转录克隆的DNA序列后获得的RNA，也常作为探针。允许使用互补的配对碱基对靶核酸检测，但所用探针必须是单链。寡核苷酸和RNA探针是自然的单链分子，然而，DNA分子正常情况下是双链，在对靶序列杂交前，DNA分子必须变为单链，这一般是通过加热使其变性而达到解链目的。解链DNA分子被迅速冷却到只能缓慢复性的温度以下，可使探针保持单链状态。靶DNA分子的检测要求用药物标记，以便观察杂交结果。探针一般用放射性同位素标记，如P32、S35、C14或H3。杂交体发出的射线，能使X光片感光而被观察到，这称为放射自显影。由于放射性物质的使用，对人体有风险，使得非放射性探针有了进一步的发展。常用地高辛(DIG)标记探针，它可被用染料标记或结合有能催化底物并形成有色产物的酶的特异性抗体检测到。　　DNA探针技术，又称核酸杂交技术，其特异性强，敏感性高，是具有潜力的诊断技术之一。在寄生虫病的诊断、现场调查及虫种鉴定等方面均已使用了DNA探针技术.
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